CHIẾT TÁCH VÀ TINH SẠCH ENZYME THỦY PHÂN FIBRIN TỪ
TRÙN QUẾ (Perionyx excavatus)
Phan Thị Bích Trâm1, Dương Thị Hương Giang1, Hà Thanh Toàn1, Phạm Thị Ánh Hồng2
1Đại học Cần Thơ, 2 Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG-Tp. HCM
 

Tóm tắt
    Sáu phân đoạn protease (FI, FII, FIII-1, FIII-2, FIII-3, FIV) có hoạt tính thủy phân fibrin đã được tinh sạch từ trùn quế (Perionyx excavatus) bằng phương pháp kết tủa acetone, kết hợp với sắc ký trên cột trao đổi ion Unosphere Q, cột tương tác kỵ nước Phenyl- Sepharose và cột lọc gel Sepharose 12. Quá trình tự phân giải trong thời gian 10 ngày ở nhiệt độ phòng có thể làm tăng hoạt tính protease của dịch trích ly lên gấp 2 lần so với hoạt tính ban đầu. Các phân đoạn protease nhận được có tính đặc hiệu cơ chất khác nhau, trên cơ chất fibrin hoạt tính rất mạnh trong khoảng từ 44,1 đến 830,7 đơn vị plasmin /mg protein với mức độ hoạt tính FIII-3>FIII-2>FI>FIII-1>FIV>FII, trên cơ chất casein hoạt tính protease yếu hơn trong khoảng từ 0,87 đến 1,81 tyrosine unit/mg protein theo mức độ hoạt tính FI>FIII-3>FII>FIII-1>FIII-2>FIV. Điện di SDS-PAGE và sắc ký lọc gel cho thấy khối lượng phân tử của các protease này nằm trong khoảng từ 28 đến 35 kDa.

ISOLATION AND PURIFICATION OF FIBRINOLYTIC ENZYME
FROM EARTHWORM PERIONYX EXCAVATUS
Phan Thi Bich Tram1, Duong Thi Huong Giang1, Ha Thanh Toan1
Pham Thi Anh Hong2
1Can Tho University, 2University of Science, VNU-HCMC

Abstract
    The six fibrinolytic fractions FI, FII, FIII-1, FIII-2, FIII-3, FIV were purified from the earthworm Perionyx excavatus lysate by acetone precipitation in combination with chromatography on ion exchange column Unosphere Q, hydrophobic column Phenyl-
Sepharose and gelfiltration Sepharose 12 column. The protease activity of the protein extract increased two times by the autolysis within 10 days at room temperature. The substrate specificity of these six fractions exposed differently on different substrates, on the fibrin plate the protease activity ranged from 44.1 to 830.7 plasmin unit/mg protein in the following order: FIII-3> FIII-2> FI> FIII-1> FIV> FII, while on the casein substrate it ranged from 0.87 to 1.81 tyrosine unit/mg protein in the order of F1> FIII-3> FII> FIII-1> FIII-2> FIV. The molecular weights of these protease fractions estimated by SDS-PAGE in combination with gel filtration were from 28 kDa to 35 kDa.