THU NHẬN KHUÔN NGOẠI BÀO TỪ NGUYÊN BÀO SỢI INVITRO
Nguyễn Thị Thanh Giang, Trần Lê Bảo Hà
Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên-ĐHQG Tp. HCM
 

Tóm tắt
    Khuôn ngoại bào (Extracellular matrix – ECM) đã được chứng minh có khả năng tăng cường sự bám dính, tăng sinh của tế bào cũng như tạo ổ tế bào gốc invitro. Chúng tôi đã tiến hành thu nhận ECM của nguyên bào sợi người nhằm phục vụ cho nhiều nghiên cứu, trong đó có kỹ nghệ mô. Nguyên bào sợi từ da quy đầu người được nuôi cấy trong môi
trường DMEM/F12 có bổ sung 10% FBS. Sau lần cấy chuyền thứ 3, các nguyên bào sợi được nhận diện bằng phương pháp nhuộm Trichrome và vimentin. Sau đó, các nguyên bàosợi này được kích thích sản xuất ECM trong môi trường có bổ sung acid ascorbic 0,05%. Các thành phần tế bào được loại bỏ bằng Triton X-100, NH4Cl, DNase. Sự hiện diện của protein nền được xác định bằng phương pháp nhuộm PAS và Trichrome. Kết quả, trong thành phần ngoại bào của nguyên bào sợi có collagen.
Từ khóa: Khuôn ngoại bào, nguyên bào sợi
 

HARVEST EXTRACELLULAR MATRIX FROM FIBROBLASTS
INVITRO
Nguyen Thi Thanh Giang, Tran Le Bao Ha
Faculty of Biology, University of Science-VNU HCMC
 

Abstract
    Extracellular matrices (ECM) have been reported to enhance cell attachment and proliferation as well as to create stem cell niches invitro. We harvested ECM from human fibroblasts for a number of researches, including tissue engineering. Fibroblasts were isolated from human foreskins, cultured in DMEM/F12 containing 10% FBS and identified by Trichrome staining and immunohistochemistry for vimentin. Then, fibroblasts were stimulated to synthetize ECM in medium supplemented 0.05% ascorbic acid. Cell constituents were removed by using Triton X-100, NH4OH, DNase. ECM proteins were evaluated by PAS and Trichrome staining. Results showed that collagen is present in ECM.
    Key words: Extracellular matrix, fibroblast