TẠO PROTEIN TÁI TỔ HỢP M2e CỦA CHỦNG H5N1 Ở DẠNG DUNG
HỢP VỚI FLAGELLIN H:1,2 CỦA SALMONELLA TYPHIMURIUM
Nguyễn Thi Diễm Trân, Nguyễn Trí Nhân, Trần Linh Thước
Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG-Tp. HCM
 

Tóm tắt
    Peptide M2e, một ectodomain của protein nền M2, có tính bảo tồn cao trong tất cả các subtype virus cúm A, nên là một đối tượng được quan tâm để phát triển văcxin đa trị phổ rộng phòng virus cúm. Trong nghiên cứu này, chúng tôi thử tạo một văcxin đa trị đối với virus cúm A bằng cách dung hợp bốn bản sao liên tiếp của M2e nối nhau bởi 6 phân tử glycine, ký hiệu (M2e)4, với flagellin H:1,2 của Salmonella Typhimurium là một protein mang có tính gây đáp ứng miễn dịch cao. Gen (m2e)4 mã hóa cho protein (M2e)4 được thu nhận bằng phương pháp PCR tái tổ hợp và được nối vào đầu 3’ của gen fljB mã hóa cho flagellin H:1,2 trong vector pGEX-fljB. Vector tái tổ hợp pGEX-fljB-(m2e)4 thu được có khả năng biểu hiện protein (M2e)4 ở dạng dung hợp với H:1,2 flagellin và GST (glutathione Stransferase). Protein GST-H:1,2-(M2e)4 được biểu hiện trong E. coli, tinh sạch và dùng để gây đáp ứng miễn dịch ở chuột. Phân tích kháng huyết thanh thu được bằng phương pháp ELISA với kháng nguyên GST-H:1,2-(M2e)4 cho thấy có sự hiện diện của kháng thể kháng
     Từ khóa: H5N1, M2e, flagellin H:1,2,Salmonella Typhimurium, văcxin đa trị, virus cúm A
 

PRODUCTION OF RECOMBINANT VIRAL H5N1 M2e UNDER THE
FUSION FORM WITH SALMONELLA TYPHIMURIUM H:1,2
FLAGELLIN
Nguyen Thi Diem Tran1, Nguyen Tri Nhan2, Tran Linh Thuoc1,2
1Center for Bioscience and Biotechnology, 2Faculty of Biology, University of Science
 

Abstract
    The ectodomain of the matrix 2 protein (M2e) is a remarkably conserved and stable sequence across all influenza A strains, thus becomes an interested objective for thedevelopment of pan-influenza universal vaccine. In this study, we constructed an tentative universal vaccine against influenza A virus by fusing four tandem copies of M2e flanked by 6 glycine linker with Salmonella Typhimurium H:1,2 flagellin, which has been known as a carrier protein of high immune response. The (m2e)4 gene was generated by recombinant PCR method and ligated to the 3’ end of S. typhimurium fljB gene encoding for H:1,2 flagellin in the pGEXfljB vector. The resulted recombinant pGEX-fljB-(m2e)4 vector can express (M2e)4 protein under the fusion form with H:1,2 flagellin and GST (glutathione S-transferase). Protein GSTH:  1,2-(M2e)4 was expressed in E. coli, purified and used to immune mice. Analysis of the harvested anti-serum by ELISA against GST-H:1,2-(M2e)4 antigen has proved the presence of
anti-GST-H:1,2-(M2e)4 antibody in the anti-serum.Key words: H5N1, M2e, flagellin H:1,2, Salmonella Typhimurium, universal vaccine, influenza A virus