BẢO QUẢN TRỨNG BÒ TRƯỞNG THÀNH BẰNG PHƯƠNG PHÁP
THỦY TINH HÓA TRONG CỌNG RẠ
Nguyễn Thị Thương Huyền1,2, Võ Thị Tuyết Nga1, Nguyễn Thị Thanh Xuân1,
Hoàng Thị Bích Tuyền1, Nguyễn Thị Phương Dung1,
Đặng Thị Thu Thủy1, Phan Kim Ngọc1
1Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên-ĐHQG Tp. HCM
2Trường Đại học Sư phạm Tp. HCM
 

Tóm tắt
    Trứng được thu nhận bằng phương pháp chọc hút, chuyển trứng vào môi trường C1 (TCM199, 10% FBS, hCG, EGF) và nuôi ở 38,5oC và 5% CO2. Trứng chín được bảo quản bằng phương pháp thủy tinh hóa: trứng được cho vào dung dịch chứa 10% DMSO + 10% EG trong 45 giây, tiếp theo cho vào dung chứa 20% DMSO + 20% EG + 1M sucrose trong 25 giây, sau đó cho vào cọng rạ (0,25 ml) và nhúng trực tiếp vào nitơ lỏng (khoảng 25-40 giây kể từ khi trứng tiếp xúc với dung dịch bảo quản). Giải đông trứng theo quy trình 3 bước. Kết quả thu được 224/536 trứng chín sau khi nuôi 24 tiếng (41,84 ± 13,50%). Tổng cộng có 114/194 trứng sống sau giải đông, đạt tỷ lệ 58,83 ± 11,10% (độ tin cậy 95%) theo quan sát hình thái.
    Từ khóa: Đông lạnh thủy tinh hóa, trứng bò.
 

CRYOPRESERVATION OF MATURE BOVINE OOCYTES BY
VITRIFICATION IN STRAWS
Nguyen Thi Thuong Huyen1,2, Vo Thi Tuyet Nga1, Nguyen Thi Thanh Xuan1,
Hoang Thi Bich Tuyen1, Nguyen Thi Phuong Dung1,
Dang Thi Thu Thuy1, Phan Kim Ngoc1
1Falcuty of Biology, University of Science-VNU HCMC, 2University of Pedagogy HCMC
 

Abstract
    Bovine oocytes collected using follicle - puncturing method were cultured in C1 medium (TCM-199, 10% FBS, hCG, EGF) at 38,5oC, 5% CO2. Matured oocytes were cryopreserved by vitrification in two steps. (i) oocytes were incubated in the solutions
containing 10% DMSO + 10% EG in 45 seconds; (ii) oocytes were then subjected in the solution containing 20% DMSO + 20% EG + 1M sucrose in 25 seconds and then loaded into straws (0,25 ml); the straws were plunged directly into liquid nitrogen within 25 – 40 seconds of beginning with the exposure to step two. Oocytes were thawed in three step procedure. After 20 - 24h incubation, the number of oocytes which were observed Metaphase II stage were 224/536 oocytes (41,84 ± 13,50%) and 114/194 (58,83 ± 11,10%) oocytes could be recovered after cryopreservation by morphological examination.
    Key words: Vitrification, bovine oocytes.