KHẢO SÁT QUY TRÌNH BIẾN NẠP GEN BAR VÀO CÂY KHOAI MÌ (MANIHOT ESCULENTA) BẰNG PHƯƠNG PHÁP BẮN GEN

 

Bùi Lan Anh, Nguyễn Phan Cẩm Tú, Trần Nguyên Vũ, Bùi Văn Lệ

Khoa Sinh, Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên

 

Tóm tắt

 

Cây khoai mì (Manihot esculenta) là cây lương thực đứng hàng thứ tư ở Việt Nam, giữ tầm quan trọng cao trong cả nông nghiệp lẫn công nghiệp. Mặc dù khoai mì không khó trồng nhưng do thời gian canh tác kéo dài nên rất dễ bị cỏ dại xâm lấn làm cho năng suất thu hoạch giảm sút. Vì thế, việc tạo ra một giống khoai mì mới có khả năng kháng thuốc diệt cỏ luôn được quan tâm hàng đầu.

Trong bài này, chúng tôi tiến hành sử dụng phương pháp bắn gen để chuyển gen bar – gen kháng thuốc diệt cỏ PPT (Phosphinothricin) – vào các mẫu cấy khoai mì in vitro và chọn lọc ra chồi non chuyển gen có khả năng kháng PPT. Kết quả cho thấy, mẫu chồi non in vitro có khả năng chuyển gen cao ở khoảng cách bắn 6 cm với nồng độ tungsten 1000 mg và nồng độ DNA 1,5 mg. Chồi non chuyển gen được chứng minh có mang gen bar dựa trên kỹ thuật PCR với cặp mồi đặc hiệu cho gen này.

 

 

 

 

STUDY ON BAR GENE TRANSFORMATION INTO MANIHOT ESCULENTA BY BIOLISTIC METHOD.

 

Bui Lan Anh, Nguyen Phan Cam Tu, Tran Nguyen Vu, Bui Van Le

Faculty of Biology, University of Natural Sciences

 

Abstract

 

Cassava (Manihot esculenta) is the fourth important crops of Vietnam, not only in agriculture but also in industry. The low productivity is not so much because of the difficulty in planting as because of a long time cultivation and the invasion of weeds.  Therefore, it is extremely important to create a herbicide resistant breed.

In this paper, we used biolistic transformation to transform bar gene - PPT (Phosphinothricin) herbicide resistant gene - into in vitro cassava samples and selected transgenic shoots resisting PPT. The result showed that in vitro early shoots had the highest transgenic ratio at 6 cm fire distance with 1000 mg tungsten and 1.5 mg DNA mix. The transgenic shoots had been proved to carry bar gene by PCR with its specific probes