THỬ NGHIỆM QUY TRÌNH ICSI TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG

MUS MUSCULUS VAR. ALBINO

 

Đỗ Ngọc Hân, Võ Thị Bích Phượng, Lê Thành Long, Phạm Văn Phúc

Khoa Sinh, Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên

 

Tóm tắt

 

ICSI trong đó một tinh trùng được chọn lọc, bắt giữ, hút vào trong vi kim và tiêm vào trong tế bào chất của trứng. Đây là kỹ thuật mới và hiệu quả nhất trong hỗ trợ sinh sản, và là một công cụ đắc lực cho nghiên cứu sinh học phát triển. Ở Việt Nam, ICSI đã được áp dụng thành công trên người, nhưng trên các đối tượng động vật khác chưa được thực hiện. Mặc dù tỷ lệ thành công của ICSI cổ điển khi áp dụng trên chuột nhắt trắng là rất thấp, nhưng vì tính cấp thiết và các ưu điểm của động vật thí nghiệm chuột nhắt trắng chúng tôi đã tiến hành thử nghiệm quy trình ICSI trên chuột trong điều kiện của phòng thí nghiệm chúng tôi. Các micropipette cho thao tác được tái sử dụng từ nguồn micropipette đã qua sử dụng. Sau khi ICSI, kiểm tra trứng sau 6 giờ và 24 giờ vi tiêm. Chúng tôi thu nhận được 461 trứng từ ống dẫn trứng, sau đó loại bỏ cumulus bằng enzyme hyaluronidase, và chọn lọc được 350 trứng tốt cho ICSI, chiếm tỷ lệ 67,57 ± 3,87%. Tiến hành vi tiêm tinh trùng cho 92 trứng thích hợp cho ICSI và chúng tôi đánh giá được 43 trứng còn nguyên vẹn sau vi tiêm, chiếm tỷ lệ 46,45 ± 4,19%. Sau 6 giờ vi tiêm, chúng tôi kiểm tra và đánh giá các trứng có 2 tiền nhân và trứng thoái hóa. Có 39 trứng thoái hóa chiếm tỷ lệ 42,62 ± 4,96% so với trứng được vi tiêm, và thu nhận được 4 trứng có 2 tiền nhân trong bào tương. Sau 24 giờ chúng tôi thu nhận được 3 phôi 2 tế bào từ 92 trứng được tiêm, chiếm tỷ lệ 2,83%.

 

ICSI ON MOUSE MUS MUSCULUS VAR. ALBINO

 

Do Ngoc Han, Vo Thi Bich Phuong, Le Thanh Long, Pham Van Phuc

Faculty of Biology, University of Natural Sciences

 

 

Abstract

ICSI_Intracytoplasmic sperm injection_ a single spermatozoon is selected, aspirated into a microinjection pipette and injected to the oocyte cytoplasmic. This is not only the latest, the most efficient technique in ART but also an extremely model for the study of development biology. In Vietnam, ICSI is only limited success in humans, it is not performed in any animals. So the researchs applied ICSI on animals are very essential. Although conventional ICSI into mouse oocytes involves a very low survival rate, we dicided to perfom ICSI on the mouse- the familiar laboratory models. This study was designed in our lab condition. The micropipettes were taken from hospital. After ICSI, we evaluated oocytes 6 and 24h after injection. We obtained a total of 461 oocytes from oviduct, then removing cumulus by rinsing in hyaluronidase, and we obtained from these 350 oocytes  suitable for ICSI (67.57 ± 3.87%). We injected sperms into 92 selected oocytes and we have 43 intact oocytes after injection (46.45 ± 4.19%).  After 6h injection, we tested these intact oocytes for the 2 pronucei-oocytes and the degenerated oocytes. There were 39 degenerated oocytes after 6h injection (42.62 ± 4.96%), and 4 oocytes had 2 pronuclei in the cytoplasm. After 24h, we test these oocytes for the 2-cell embryo, we received 3 from the 92 injected oocytes (2.83%).